Покращене відстеження ДНК сповіщає зрадників оливкової олії

Автор Джулі Батлер
Olive Oil Times Учасник | Репортаж з Барселони

Доктор Хуан де Діос Алче та доктор Фендрі Махді

Іспанські вчені стверджують, що вони близькі до пропозиції ​"тести на батьківство» для оливкової олії першого віджиму, яка була б потужним союзником проти шахрайства.

Їхній прогрес у мистецтві зняття відбитків пальців ДНК означає, що тепер їм потрібні лише відносно невеликі зразки — зазвичай 100–200 мл — щоб перевірити, чи справді оливкова олія першого віджиму відповідає заявленому сорту та походження.

І на відміну від хімічних і сенсорних тестів - результати яких можуть якнайбільше вказувати на те, що олія була розрізана іншою рослинною олією - виявлення ДНК, скажімо, фундукової або соняшникової олії в оливковій олії є однозначним. доказом його наявності, мовляв.

Про це повідомив доктор Хуан де Діос Алче, провідний дослідник проекту Іспанської національної дослідницької ради (CSIC).Olive Oil Times попереду ще багато роботи, але він сподівається, що протягом шести місяців тест буде комерційно доступним.

"У нас уже було чимало контактів з людьми в харчовому секторі, в тому числі зі Сполучених Штатів, і ми вважаємо, що на це великий попит», – сказав він.

Алче, з кафедри біохімії, клітинної та молекулярної біології рослин CSIC, частинаЕстасьон Експериментальний дель Зайдін Інституту в Гранаді також пояснив, що він суттєво доповнить, але не замінить інші верифікаційні тести.

Olive Oil Times: Які переваги цього тесту?

Доктор Хуан де Діос Алче: Оливкова олія першого віджиму є відносно дорогою, і люди готові платити більше за якості, які вони цінують, наприклад олію з певного регіону або сорту, чим користуються нечесні виробники. За допомогою цього тесту ми можемо перевірити автентичність оливкової олії, що підтверджує, чи дійсно воно має походження та сорт чи різновиди, зазначені на етикетці.

З: Які його обмеження?

В: Це не тест, який визначає сорт оливкової олії. Крім того, він вимагає виявлення неушкодженої ДНК, яку часто важко знайти в рафінованій олії. Це одна з причин, чому його розроблено для використання для оливкової олії першого віджиму, і його слід розглядати як доповнення до інших тестів, а не як заміну.

Крім того, в деяких випадках ми не можемо позитивно проаналізувати зразки, тому що вони мають дуже, дуже малу кількість ДНК або тому, що ДНК деградує. У таких випадках нам доводиться використовувати більші зразки, іноді до 1 л. Використання високих температур під час подрібнення є одним із способів деградації ДНК.

З: Як ви прийшли до розробки тесту?

В: У рамках нашого дослідження пилку ми розробили велику базу даних фрагментів ДНК, взятих з листя більш ніж 90 різних сортів оливок, в основному з Іспанії, Португалії та Тунісу, але також із найпоширенішими сортами з Італії, Греції, Франції, Марокко та Лівану.

Одним із його застосувань є сертифікація сорту оливок за допомогою вакцин проти алергії на пилок олив, але ми спробували і виявили, що також можемо використовувати його для ідентифікації оливкової олії, навіть якщо в Іспанії цілі плоди оливи, включаючи кісточки, його подрібнюють, щоб отримати олію, і ми не знаємо точно, звідки походить ДНК, яку ми знаходимо в ньому.

З: Ваша база даних базується на ДНК з листя оливкового дерева, але вчені повідомили, що виявили, що ДНК в листі оливкового дерева не збігається з ДНК олії дерева.

В. Ми виявили, що в переважній більшості випадків вони збігаються.

З. Як працює тест?

Відповідь: Він заснований на використанні мікросателітів (також відомих як SSR - Simple Sequence Repeats) як молекулярних маркерів. Ми витягуємо ДНК і використовуємо те, що Відомий як полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) для ампліфікації цих послідовностей SSR. Потім ми перевіряємо їх розмір, упорядковуючи та порівнюючи розміри з тими, що вже є в нашій базі даних.

Інші молекулярні маркери тепер забезпечують навіть більш високу роздільну здатність, ніж SSR, але ми все ще використовуємо мікросателіти, оскільки вже існує багато баз даних, заснованих на них, таких як наша, їх легко інтерпретувати та відтворювати, і вони мають високу дискримінаційну силу.

Питання: Чи триває тест довго і чи складна попередня обробка зразка?

В: Наразі це займає 7-10 днів, включаючи аналіз. Ми витягуємо ДНК за допомогою центрифуги, розчинників та комерційних наборів, які ми налаштували, а також використовуємо для тесту спеціалізоване лабораторне обладнання, особливо термоциклер для ПЛР та капілярний секвенатор. Необхідна попередня обробка зразка не це складний, умовно кажучи.

З: Якого прогресу ви досягли за останні два роки?

Окрім розширення бази даних, ми оптимізували процес вилучення ДНК із зразків нафти.Ми використовуємо різні методи вилучення ДНК, деякі з них є комерційно доступними, але налаштовані нами, ми також оптимізували процес посилення.

З. Чи буде цей тест досить економічно ефективним для широкого використання?

В. Ціна ще не визначена, оскільки ми не використовуємо наш метод в комерційних цілях. Але ми виявили, що на нього є попит у харчовому секторі, і можливо, що приблизно через через півроку ми зможемо запропонувати це як послугу, і так, це буде доступним. Невеликий зразок може перевірити велику партію масла.

Q: Над чим ви зараз працюєте?

Тест займає багато часу, тому ми намагаємося зменшити це. Ми також плануємо випробувати більш широкий асортимент оливкової олії.

Крім того, хоча нам вдалося виявити ДНК з фундукової та соняшникової олії в оливковій олії, поки що ми можемо лише підтвердити наявність сторонніх масел, ми не можемо кількісно визначити пропорцію, тож ми також працюємо над цим.

Подальше читання про молекулярні маркери та перевірку автентичності оливкової олії:

- Відстежуваність оливкової олії, зародок оливкової плазми — вирощування оливок, промисловість столових оливок та оливкової олії в Італії, д-р Інноченцо Муццалупо (ред.)

- Огляд аутентифікації оливкового дерева та олії

- Життя 70-х років – виявлення фальсифікації за допомогою олій насіння, Річард Гавел

джерела:

Розроблена техніка для виявлення потенційних шахрайств з оливковою олією. (Прес-реліз іспанською мовою експериментальної станції Зайдін Національної дослідницької ради Іспанії.)
Боротьба з харчовими шахрайствами за допомогою науки, Chemistry World
Ідентифікація Olive стає швидким і простим, Olive Oil Times